总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP单试剂微板法)

简介： 
胆固醇(Cholesterol)又称胆甾醇，是一种环戊烷多氢菲的衍生物，分子式C27H46O，分子量为3860.65。胆固醇广泛存在于动物体内，其中脑、神经组织最丰富，在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也较高。 
Leagene总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP单试剂微板法)又称胆固醇氧化酶法或胆固醇氧化酶-过氧化物酶偶联法等，血液中的胆固醇约1/3为游离胆固醇，2/3为与脂肪酸结合的胆固醇酯，后者被CEH水解为游离胆固醇，使4-氨基安替比林与酚(三者合称PAP)反应，生成红色醌亚胺色素(Trinder反应)。酶标仪在500~520nm处进行比色测定。本试剂盒用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的总胆固醇含量定量测定。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。  

操作步骤(仅供参考)： 

1、 样本处理： 
①血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水稀释后检测。 ②细胞样本： 
a、取适量的细胞(一般推荐>106以上)，离心，弃上清，留取沉淀。 b、用PBS或生理盐水清洗1~2次，离心，弃上清，留取沉淀。 
c、加入200~300μl的PBS或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300W，每次3~5s，间隔30s，重复3~5次。亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心，待用。 d、③组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水或PBS(ml)=1：9的比例，加入生理盐水或PBS，冰浴条件下手动或机械匀浆。离心取上清待用。 

2、 酶标仪TC测定操作:                                                                     
①按下表依次加入试剂：   

②充分混匀,水浴中孵育。 
③酶标仪测定500~520nm吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。

3、 分光光度计(1ml比色杯)、半自动生化分析仪TC测定操作: 

①按下表依次加入试剂：

②充分混匀,孵育。 
③分光光度计测定500~520nm吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。

4、 普通分光光度计(2ml比色杯)TC测定操作: 

①按下表依次加入试剂：

②充分混匀,水浴中孵育。 
③分光光度计测定500~520nm吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。 

5、 全自动生化分析仪TC测定操作: 

①按下表依次加入试剂：

②充分混匀,水浴中孵育。 
③全自动生化分析仪测定500~520nm波长处吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。

主波长/次波长 500/600nm 反应类型 终点法 反应方向 
升反应(+) 
 
计算公式：  
血清、血浆等液体样本(空白调零)： 
TC(mmol/L)=｛(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度-空白吸光度)｝×5mmol/L 血清、血浆等液体样本(全自动生化分析仪)： 
TC(mmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×5mmol/L 细胞、组织等样本(空白调零)： 
TC(mmol/L)=｛(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度-空白吸光度)｝×5mmol/L÷待测样本浓度(mg/ml) 
细胞、组织等样本(全自动生化分析仪)： 
TC(mmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×5mmol/L÷待测样本浓度(mg/ml) 
参考区间： 
健康成年人理想范围：<5.2mmol/L(<200mg/dl) 
          边缘升高：<5.23~5.69mmol/L(201~219mg/dl)               升高：≥5.72mmol/L(≥220mg/dl)     备注：TC标准(5mmol/L)=442.48mg/dl  
性能指标：